|
|
聯(lián)系我們 |
|
|
 |
|
河南新普康動(dòng)物藥業(yè)有限公司 |
全國(guó)免費(fèi)熱線：400-803-1781
電 話： 0371-65733735
傳 真： 0371-63682016
QQ號(hào)： 1532077189
郵 箱： hnxpk@126.com
網(wǎng) 址： www.hnxpk.com
地 址：河南省鄭州市瀚海北金B(yǎng)座
廠 址：河南省焦作市溫縣黃河街道緯二路東段1051號(hào)
|
|
|
|
|
|
|
|
|
 |
|
| 詳細(xì)內(nèi)容 >> |
|
|
|
中藥發(fā)酵是具有高科技水平的新技術(shù) |
|
來(lái)源于：本站 發(fā)表于：2024-8-22 |
|
發(fā)酵是指運(yùn)用生物體（包括微生物、植物細(xì)胞等）的代謝功用，使有機(jī)物分解的生物化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程。以適宜的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)，通過(guò)微生物的生長(zhǎng)代謝和生命活動(dòng)產(chǎn)生豐盛的次生代謝產(chǎn)品。學(xué)習(xí)中醫(yī)藥組方思維，將單味中藥、具有相似或協(xié)同果的中藥進(jìn)行發(fā)酵，目的是產(chǎn)生新化合物、增強(qiáng)功或者下降單藥物不良果。中草藥經(jīng)發(fā)酵、生物轉(zhuǎn)化后，其有用成分能被充分分別、提取；經(jīng)生物轉(zhuǎn)化更具有生物活，在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中具有重要方位。中藥的發(fā)酵工程和酶工程已被列為科技部“十五展開規(guī)劃”中的重要項(xiàng)目之；黑龍江省科學(xué)院微生物研討所，哈爾濱中科生物工程有限公司聯(lián)合開發(fā)的中藥發(fā)酵制劑是完成中藥現(xiàn)代化、具有高科技水平的新技術(shù)、新產(chǎn)品。
1中藥發(fā)酵的前史和現(xiàn)狀
1.1中藥發(fā)酵的前史
發(fā)酵中藥的運(yùn)用在我具有悠長(zhǎng)的前史，是傳統(tǒng)中藥加工假造的重要方法之，發(fā)酵中藥作為種假造、加工工藝，不光改動(dòng)了煎、煮、熬、煉、蒸、浸的傳統(tǒng)工藝，并且使藥前進(jìn)、藥產(chǎn)生改動(dòng)。如中藥淡豆豉為桑葉或麻黃等的發(fā)酵品，不同的培養(yǎng)基經(jīng)同樣的微生物處理后會(huì)產(chǎn)生藥的差異，運(yùn)用該特可出產(chǎn)不同適應(yīng)癥的中藥，發(fā)酵淡豆豉時(shí)以桑葉、青蒿發(fā)酵者，藥偏于寒涼，多用于風(fēng)熱感冒或熱胸中愁悶之癥；以麻黃、紫蘇發(fā)酵者，藥偏于辛溫,多用于風(fēng)寒感冒頭痛之癥［2］，以上中藥的假造進(jìn)程是微生物發(fā)酵中藥復(fù)合體系的建立進(jìn)程。現(xiàn)在臨床運(yùn)用的發(fā)酵(制品)中藥要有神曲、半夏曲、淡豆豉、豆黃等，其工藝均為固體發(fā)酵。
1.2中藥發(fā)酵的現(xiàn)狀
除傳統(tǒng)的中草藥假造，以中草藥發(fā)酵出產(chǎn)藥物的研討起步較晚，20世紀(jì)80年代的研討要會(huì)集在真菌類自身發(fā)酵產(chǎn)生次生代謝，如靈芝菌體、冬蟲夏草菌體發(fā)酵等,多為單發(fā)酵［3］�，F(xiàn)代運(yùn)用中草藥發(fā)酵的研討已從單味藥觸及到復(fù)方研討且取得明顯果，成藥片仔癀即是用麝香、牛黃、蛇膽、三七等寶貴中藥的微生物發(fā)酵物,為臨床退黃、消腫的良藥；三株口服液屬營(yíng)養(yǎng)保健食物，它以大豆芽為材料，在牛肉湯、大豆芽浸液、酵母膏、蔗糖、葡萄糖中參加雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌和DL菌聯(lián)合發(fā)酵制成，產(chǎn)品有益于堅(jiān)持胃腸道健康。楊海龍等［4］借助真菌靈芝產(chǎn)生的豐盛酶系通過(guò)對(duì)薏苡仁的轉(zhuǎn)化，使薏苡仁的要成分產(chǎn)生了改動(dòng)。“恢復(fù)靈”為抗癌驗(yàn)方，要成分有靈芝發(fā)酵菌、黨參、麥冬、豬苓、薏苡仁、淮山藥等，經(jīng)生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化后大都樣品具有克制小鼠/180肉瘤生長(zhǎng)的果［5］。以上中藥發(fā)酵成功的事例充分闡明微生物發(fā)酵已成為中藥現(xiàn)代化研討的重要內(nèi)容之。
外關(guān)于中藥發(fā)酵的研討報(bào)導(dǎo)較少，要在食物、酶工程，如日本的納豆，用Bacillus菌發(fā)酵大豆，因?yàn)锽acillus菌酶系豐盛，包括淀粉酶、纖維素酶和蛋白酶，且能增加維生素K含量，Bacillussubtilis菌環(huán)能消除小腸內(nèi)致菌，其提取物具有明顯的抗癌活和降壓果［6］。中草藥發(fā)酵的研討有必要學(xué)習(xí)上述成功的經(jīng)歷。
2發(fā)酵在中藥研討中的運(yùn)用
2.1前進(jìn)有用成分提取率
中草藥中植物類藥材占90％，藥材有用成分多存在于胞漿中，植物細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)、木質(zhì)素等物質(zhì)構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。在中藥有用成分提取進(jìn)程中，當(dāng)胞漿中的有用成分向提取介質(zhì)渙散時(shí)，有必要克服細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)的兩層阻力，使有用成分浸出受阻。微生物可運(yùn)用中藥中的成分為營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行割裂、生長(zhǎng)、繁衍和代謝，在代謝進(jìn)程中排泄蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶等幾十種胞外酶進(jìn)入培養(yǎng)基，使細(xì)胞決裂，細(xì)胞空地增加，減小細(xì)胞壁、細(xì)胞間質(zhì)等傳質(zhì)屏障對(duì)有用成分從胞內(nèi)向提取介質(zhì)渙散的傳質(zhì)阻力。體外實(shí)驗(yàn)證明對(duì)盾葉薯蕷選用預(yù)發(fā)酵有用組分薯蕷皂苷元的產(chǎn)率明顯前進(jìn)［7］。
2.2前進(jìn)有用成分的吸收和運(yùn)用
傳統(tǒng)中草藥給藥途徑多選用口服，小分子活物質(zhì)易通過(guò)血腦屏障而與人體細(xì)胞蛋白結(jié)合,因此比大分子物質(zhì)具有更高的活。藥物中的有用成分在進(jìn)入腸道后與腸道菌群產(chǎn)生相關(guān)，某些成分經(jīng)細(xì)菌的果產(chǎn)生代謝轉(zhuǎn)化后被吸收，體內(nèi)環(huán)境中腸道菌群是完成中藥有用成分代謝的重要因素之。研討證明多種中藥有用成分被腸道菌群代謝后產(chǎn)生轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生出具有較強(qiáng)藥理活的代謝產(chǎn)品。如大豆異黃酮要以9種異黃酮糖苷和3種相應(yīng)的配糖體組成，經(jīng)腸道微生物果，部分糖苷脫離釋放出游離式的二羥基異黃酮(大豆苷元,daidzein)和三羥基異黃酮(染料木黃酮,genistein)，這兩種異黃酮可以被機(jī)體有用吸收［8］。中藥經(jīng)發(fā)酵處理更有利于有用成分的吸收和運(yùn)用。
2.3產(chǎn)生新化合物
王玉紅等［9］在靈芝發(fā)酵進(jìn)程中參加黃芪，果發(fā)酵液中多糖的組分產(chǎn)生改動(dòng),有或許產(chǎn)生新的物質(zhì)。李紅［10］用枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn對(duì)三七須根進(jìn)行發(fā)酵，得到5個(gè)新化合物。微生物在割裂、生長(zhǎng)、繁衍和代謝進(jìn)程中可將中草藥的成分分解轉(zhuǎn)化，因?yàn)橹兴幍哪承┪镔|(zhì)或許對(duì)微生物的生長(zhǎng)代謝及活成分的產(chǎn)生有促進(jìn)或克制果，微生物在中藥的特別環(huán)境中也有或許改動(dòng)自身的代謝途徑，在生長(zhǎng)進(jìn)程中產(chǎn)生豐盛的初生或次生代謝產(chǎn)品，或以中藥中的有用物質(zhì)或些非有用物質(zhì)為前體，經(jīng)酯化、氧化、葡萄糖基化、異構(gòu)化、甲基化、去甲基化、乙�；榷喾N生物轉(zhuǎn)化構(gòu)成新的化合物，發(fā)酵具有反應(yīng)選擇強(qiáng)、反應(yīng)條件溫文、副產(chǎn)品少、不形成環(huán)境污染和后處理簡(jiǎn)略以及可以進(jìn)行傳統(tǒng)有機(jī)合成所不能或很難進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)等長(zhǎng)處［11，12］，具有般化學(xué)反應(yīng)無(wú)法比擬的長(zhǎng)處。
2.4減增
微生物有或許將中藥中的有物質(zhì)進(jìn)行分解,然后下降藥物的副果。喜樹堿具有較強(qiáng)的抗腫瘤活,同又具有嚴(yán)峻的胃腸，如克制骨髓功用和引起出血膀胱炎等，約束了它在臨床的進(jìn)步運(yùn)用，10-羥基喜樹堿是喜樹堿的結(jié)構(gòu)相似物，對(duì)多種癌癥具有明顯的果，且副果很小，但它在喜樹中的含量?jī)H為十萬(wàn)分之二，提取分別費(fèi)時(shí)、吃力，朱關(guān)平［13］選用無(wú)黃曲霉菌株1T-419將喜樹堿轉(zhuǎn)化為10-羥基喜樹堿，轉(zhuǎn)化率達(dá)50%以上。
大黃生用瀉下果峻烈，易引起腹痛、討厭等胃腸道反應(yīng)。大黃瀉下成分要是結(jié)合蒽醌衍生物，其間以二葸酮番瀉苷的果強(qiáng)。在中醫(yī)臨床中，為了平緩大黃的瀉下果及對(duì)胃腸道的不良反應(yīng)，常用不同的假造方法，使結(jié)合蒽醌分解或破壞，然后平緩瀉下果和其它副果，研討用酵母菌發(fā)酵大黃，果大黃總蒽醌含量略有下降，結(jié)合型蒽醌含量下降，分別型蒽醌含量增加，起到減增的果［14］。
3中藥發(fā)酵的關(guān)鍵問(wèn)題
3.1選擇適宜發(fā)酵的藥材
包括單味藥或復(fù)方。達(dá)眀等［15］研討了猴頭菌轉(zhuǎn)化銀杏葉提取物對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿模型小鼠血糖水平的影響，果標(biāo)明猴頭菌轉(zhuǎn)化銀杏葉提取物的轉(zhuǎn)化產(chǎn)品的降血糖才干明顯前進(jìn)。李紅等［16］曾運(yùn)用枯草芽孢桿菌（Bacilllussubtilis）對(duì)50種中藥進(jìn)行發(fā)酵，檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)品與材料對(duì)結(jié)核分支桿菌（Mycobacteriumtuberculosis）和榛色青霉菌（Penicilliumavellaneum）的抗菌活。果標(biāo)明連翹等中藥的發(fā)酵產(chǎn)品抗菌活增加，而苦參等中藥的發(fā)酵產(chǎn)品抗菌活下降，部分中藥的活不變，闡明并非切藥材發(fā)酵都能增加果的，選擇針對(duì)某活功用的發(fā)酵的藥材是中藥發(fā)酵研討的底子作業(yè)。徐啟華等對(duì)中藥復(fù)方玉屏風(fēng)散煎劑進(jìn)行發(fā)酵，果玉屏風(fēng)散發(fā)酵液對(duì)小鼠的免疫功用增強(qiáng)，果要強(qiáng)于玉屏風(fēng)散煎劑［17］。
3.2適宜發(fā)酵的菌種
傳統(tǒng)中藥發(fā)酵多用自然菌，如中藥淡豆豉。蔡琨等［18］用純種發(fā)酵淡豆豉以染料木素和大豆黃素為目標(biāo)檢測(cè)要有用成分，果認(rèn)為純種發(fā)酵可以確保淡豆豉出產(chǎn)的穩(wěn)定和產(chǎn)值的前進(jìn)。張玲琪等［19］從長(zhǎng)春花莖的韌皮部中分別出種內(nèi)生真菌，用該真菌發(fā)酵長(zhǎng)春花產(chǎn)生抗癌藥長(zhǎng)春新堿。此方面研討觸及自然菌、內(nèi)生菌和特種菌，哪類菌種更適宜中藥發(fā)酵需進(jìn)行深化研討。
3.3中藥發(fā)酵條件優(yōu)化
徐啟華等［17］選取不同菌種如兩株酵母菌、培養(yǎng)基如培養(yǎng)基即YPD、PDA和麥芽汁發(fā)酵中藥復(fù)方玉屏風(fēng)散，調(diào)查腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的才干,直接反映藥改動(dòng)狀況，果標(biāo)明，玉屏風(fēng)散經(jīng)用酵母菌進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化后,明顯前進(jìn)了小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功用以及明顯增強(qiáng)了巨噬細(xì)胞和T、B淋巴細(xì)胞的增殖才干。不同菌種、培養(yǎng)基、溫度、濕度、發(fā)酵時(shí)間等條件是中藥發(fā)酵的詳細(xì)、關(guān)鍵因素。
3.4活成分的選擇
因?yàn)橹兴幾陨眢w系含糊，微生物生長(zhǎng)特的多樣，發(fā)酵后會(huì)產(chǎn)生更多的化合物，發(fā)酵產(chǎn)品歸納研討--分別、純化等條件的優(yōu)化，從雜亂的發(fā)酵產(chǎn)品中分別出有用成分是中藥發(fā)酵的關(guān)鍵，活選擇應(yīng)偏重方法的可行和實(shí)用，以細(xì)胞和分子水平建立的高通量藥物選擇體系可測(cè)定的信號(hào)，如色、熒光、免疫反應(yīng)、發(fā)光、放射等，做到簡(jiǎn)略、有用、可行、牢靠。
3.5選擇合理的藥理模型
合理的藥理模型是發(fā)酵產(chǎn)品活成分選擇的重要保障，藥理實(shí)驗(yàn)愈加清晰微生物的質(zhì)以及改動(dòng)進(jìn)程，選擇可以排泄特異果于活物質(zhì)的體表里實(shí)驗(yàn)，因?yàn)橄嚓P(guān)于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)而言體外實(shí)驗(yàn)更省時(shí)、省力、成本低、選擇量大，體外實(shí)驗(yàn)適宜很多選擇。徐萌萌［20］運(yùn)用微生物發(fā)酵進(jìn)程中產(chǎn)生的酶系,建立苷類中藥體外轉(zhuǎn)化模型,將苷類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的苷元,有用前進(jìn)了活成分的生物運(yùn)用度。其次，對(duì)中藥也應(yīng)該進(jìn)行成分與藥理果的全面研討，深化研討中藥多靶點(diǎn)果的機(jī)理，并用相應(yīng)模型進(jìn)行科學(xué)的闡述，進(jìn)而建立中藥多靶點(diǎn)果的形式。后將發(fā)酵產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的對(duì)比研討，通過(guò)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的成分、藥理藥及理對(duì)比，尋找現(xiàn)在比較緊缺天然產(chǎn)品的替代品。合理的藥理模型往往會(huì)起到事半功倍的果。
4展望
對(duì)中草藥的成分進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，通過(guò)藥理選擇模型來(lái)確認(rèn)轉(zhuǎn)化前后藥的改動(dòng)，需求中藥學(xué)、微生物學(xué)、分析化學(xué)、藥理學(xué)等多學(xué)科參與。跟著多學(xué)科的交叉展開，微生物發(fā)酵中藥的研討必將取得個(gè)長(zhǎng)足的展開，微生物發(fā)酵中藥也必將在中藥現(xiàn)代化進(jìn)程中表現(xiàn)出健壯的生命力。有學(xué)者呼吁中藥發(fā)酵制藥可按新藥批閱方法規(guī)則開發(fā)新藥，正在修訂中的我新藥申報(bào)輔導(dǎo)準(zhǔn)則,已決定將生物轉(zhuǎn)化列入創(chuàng)新(類)藥的研討。中藥成分的生物轉(zhuǎn)化將成為中藥創(chuàng)制新藥研討的重要方面。因此，運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)大規(guī)模工業(yè)化提取中草藥的有用生物活成分，展開具有中特色的生物技術(shù)醫(yī)藥工業(yè)具有寬廣的前景。
|
|
|
|
|
|
